Phis2自激活
Webb6 sep. 2024 · 1)pHis2-bait和AD-prey质粒混合作为实验组,将pHis2-bait和空载AD质粒混合作为自激活组。 将实验组和自激活组分别共转到Y187感受态细胞中。 2)用SD/-Leu/ … Webb1.构建载体目的基因融合连入pGADT7-Rec2(AD); 顺式作用元件连入pHis2或pHis2.1载体(顺式元件可以只连接一个拷贝, 也可以连接3个串联的并测序确认无误)。 2.验证两载体分 …
Phis2自激活
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http://www.zoonbio.com/molecular/yeast-one-hybrid-procedure.html Webb27 mars 2024 · 酵母单杂交.ppt,酵母单杂交系统 吉林大学 植物科学学院 2010级硕士 酵母单杂交系统原理 质粒和菌株 质粒:诱饵质粒pHIS2,文库质粒为pGATD7-rec2 诱饵质粒上连接有目标靶序列,最小启动子和报告基因 文库质粒则和反转录得到的真核生物cDNA连接,可以表达AD杂合蛋白 酵母菌株:Y187 GAL4基因是缺失型的 ...
Webb泰斯拓生物向社会各界提供古菌、细菌、放线菌、酵母菌、丝状真菌等共享菌株资源,. 包括模式菌株、标准菌株(质控菌株)、生产菌株、以及用于研发的菌株,. 覆盖了科研、教育、农林、工业、海洋等行业的科研、生产和检验用菌株。. 且我司提供国外各 ... Webb挑取pHIS2的单个克隆接种于含有Kan(50 mg/L)的LB液体培养基中于37℃摇床中180 r/min过夜培养,用质粒小量提取试剂盒提取质粒后用Eco R Ⅰ和Sac Ⅰ进行双酶切,并纯化回收。 1.2.3 连接及转化. 将稀释后的复性双链DNA片段与切后的pHIS2进行连接,反应体系如 …
Webb先下结论,不存在可以预测蛋白是否互作的预测方法,小分子和蛋白互作可以通过计算MM-PBSA结合自由能来预测,蛋白-蛋白是否互作需要借助实验手段如IP、等温滴定量热(ITC)或者表面等离子共振(SPR)。. 有了实验基础,可以通过模拟的方式预测蛋白的结 … Webb30 nov. 2024 · 技术原理:2个结构域彼此分离但为功能必需的结构域,单独作用不能激活转录反应,当二者在空间上充分接近时,则呈现完整的GAL4转录因子活性使启动子下游基因(抗性筛选、蓝白斑筛选、营养缺陷型筛选等)得到转录。 把需要检测的蛋白质分别与BD和AD融合,形成 bait 融合蛋白(BD- bait)和 prey 融合蛋白(AD-prey),如果 bait …
Webb11 juli 2014 · 常用载体及通用测序引物,测序通用引物,华大测序通用引物,载体通用引物,petduet 1测序引物,通用引物,测序引物,pet28a测序引物,m13通用引物,细菌通用引物,病毒通用引物. VectorPrimer (F)Primer (R)抗性载体大小 (bp)EZ-TM13-47RV-MAmp+2984LZRS-RfALZRS-FLZRS-R11100p3xFLAGMV14CMV30 (834bp)CMV24 ...
Webb22 juli 2013 · Description. pHIS2 is a reporter vector that can be used in yeast one-hybrid assays to identify and characterize DNA-binding proteins. The vector was specifically designed for use with the BD Matchmaker One-Hybrid Library Construction & Screening Kit (#K1617-1). It contains a HIS3 nutritional reporter gene, located downstream of a … earl marriott pow wowWebb酵母单双杂交(点对点),最终结果是确定候选的DNA-蛋白质是否存在相互作用。. 二、实验步骤. 1. 准备酵母感受态细胞(LiAc Method)。. 2. pGADT7和pHIS2共转化酵母菌株Y187,涂二缺平板,28度恒温箱培养。. 3. 挑取二缺平板克隆至三缺(含不同浓度3-AT),28度恒温箱 ... css in mendixWebbThe T7 promoter in pGADT7-Rec2 can be used for in vitro transcription and translation of the HA-tagged fusion protein. It also provides a binding site for sequencing with the T7 Promoter Sequencing Primer. pGADT7-Rec2 is a shuttle vector; it can be maintained in both yeast and bacteria. It contains an autonomous replication sequence (ARS4) and ... earl marriott schoolWebbactivation domain in pGADT7-Rec2. The target DNA sequence, or Bait Sequence, is cloned into pHIS2.1 as one copy or tandem repeats. Interaction between a DNA-binding protein … css in massachusettsWebb9 juni 2024 · 南京瑞源生物技术有限公司主要提供酵母膜蛋白、酵母文库、酵母菌落、酵母单杂、酵母双杂、核转录因子、启动子结合、逆境筛选、分子互作等解决方案及技术服务,业务范围覆盖江苏、浙江、山东、河南、陕西、福建、北京、上海等地。 css in muiWebbVector database is a digital collection of vector backbones assembled from publications and commercially available sources. This is a free resource for the scientific community … earl marriott high schoolWebbY187-pHis2YeastOne-HybridMediaKit(酵母单杂培养基套装YM1010),含有用于Y187-pHis2系统 酵母单杂交文库筛选的全套培养基,性价比更高。培养基以非常方便使用的 … css in mental health